Examenes de laboratorio y gabinete.

Exudado Vaginal.

El exudado vaginal es una prueba con la cual permite certificar o descartar de una posible infección viral o bacteriana en los órganos reproductores femeninos.

Principalmente se utiliza para conocer la etiología de una vaginosis y vaginitis.

Material necesario.

-Camilla ginecológica 

-Espéculo estéril 

-Hisopos de alginato cálcico o Dracon, con medio de transporte. 

-Tubo con 1 mi de suero fisiológico y pipeta descartable. 

Condiciones Previas.

La paciente no debe tomar antibióticos, ni utilizar soluciones antisépticas vaginales, óvulos ni pomadas en los días previos a la recolección de la muestra. 

No debe mantener relaciones sexuales 48 hs antes de la toma de muestra. 

Técnica

Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin lubricante” (si fuera necesario lubricar, utilizar solo agua tibia)
Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo del fondo del saco vaginal posterior.
Repetir la operación con un segundo hisopo. -Recoger con la pipeta una muestra de fondo de saco y descargar en el tubo con suero fisiológico.

Número de muestras y/o volumen.

Se obtendrán dos hisopos, uno destinado al estudio microscópico y otro al cultivo. La muestra en suero fisiológico se destinará al examen en fresco para investigación de Trichomonas vaginalis.

Observación en fresco.

El examen en fresco de muestras vaginales es una técnica de diagnóstico rápida y de sencilla realización que permite identificar tanto Trichomonas Vaginalis como levaduras del género Candida (se debe considerar que una misma paciente puede presentar ambas infecciones simultáneamente)

Material.

• Torunda de algodón estéril. 
• Suero salino estéril. 
• Portaobjetos. 
• Cubreobjetos 20mmx20mm. 
• Microscopio.

Toma de la muestra.

• Siempre que sea posible, se utilizará un espéculo para la adecuada visualización y recogida de la muestra. El espéculo se debe introducir en la vagina sin lubricante (puede emplearse agua templada en su lugar). 
• Con una torunda de algodón estéril, tomar el exudado vaginal frotando en la zona donde sea más abundante o bien del fondo de saco vaginal posterior. 
• Registrar la muestra con su número de identificación y los datos de la paciente en el libro o cuadernos de registro.

Procesamiento de la muestra.

Debe llevarse a cabo inmediatamente después de la obtención de la muestra, sobre todo si se sospecha infección por Trichomonas vaginalis: 

• Rotular o etiquetar un portaobjetos con el nombre de la paciente o el nº de identificación de la muestra. 
• Depositar una gota de solución salina atemperada y estéril sobre un portaobjetos (37ºC o temperatura ambiente si lo anterior no es posible). En el caso de sospecha de infección por Candida no es necesario que la solución salina esté atemperada.
• Una vez tomada la muestra, extenderla rápidamente sobre el portaobjetos, mezclándola con la solución salina. 
• Colocar sobre la preparación un cubreobjetos. 
• Visualizar al microscopio con los objetivos 10x y 40x. 
• Si la paciente presenta Trichomonas se podrán observar estos microorganismos con su movilidad característica.
• Si la paciente presenta Candida, se podrán observar las levaduras.

Frotis con tinción de Gram.

Se emplea para la observación microscópica de muestras clínicas y de cultivos bacterianos. Permite visualizar la mayoría de las bacterias y algunos hongos, por lo que con ella se puede hacer el diagnóstico de infección por Candida, y detecta además si la paciente padece vaginosis bacteriana. Permite diferenciar las bacterias en dos grandes grupos: 

• Gram positivas: se tiñen de azul. 
• Gram negativas: se tiñen de rojo.

También permite identificarlas por su forma: 

• Cocos: bacterias redondas. 
• Bacilos: bacterias alargadas.

Material Necesario.

• Torunda de algodón estéril. 
• Portaobjetos. 
• Mechero de alcohol o gas. 
• Agua. 
• Reactivos: Cristal Violeta, Lugol, Alcohol-Acetona, Safranina o Fucsina.
• Microscopio. 
• Aceite de inmersión para el microscopio.

Toma de la muestra.

El mismo que se realizó para la observación en fresco.

Procesamiento de la muestra.

1.Una vez tomada la muestra, preparar una extensión de la misma sobre un portaobjetos. 

2. Dejar secar a temperatura ambiente (hasta que la muestra esté completamente seca). 

3. Fijar la muestra con calor pasando el portaobjetos por encima de la llama de un mechero durante unos segundos y dejar enfriar. A partir de este momento la muestra ya está lista para ser teñida. 

4. Cubrir completamente la preparación con el reactivo llamado cristal violeta y dejarlo actuar durante un minuto. 

5. Lavar con agua. 

6. Cubrir la preparación completamente con el reactivo lugol y dejarlo actuar durante 1 minuto. 

7. Lavar con agua. 

8. Decolorar la preparación con alcohol-acetona durante unos segundos (15- 20 seg). Recuerde que este el paso más importante de la tinción, no sobrepase ese tiempo. Las bacterias gram positivas quedan teñidas de azul, las gram negativas se decoloran. 

9. Lavar con agua. 

10. Cubrir la preparación con safranina o fucsina diluida durante 1 minuto. 

11. Lavar con agua. Las bacteria gram negativas quedan teñidas de rojo y las gram positivas permanecen azules. 

12. Dejar secar la preparación en posición vertical (puede utilizarse papel de filtro o simplemente esperar hasta que esté completamente seca).

13. Visualizar en microscopio con objetivo 100x y aceite de inmersión. Las levaduras (Candida) tienen una forma ovoide, en muchas ocasiones se las puede observar en gemación y pueden presentar prolongaciones denominadas pseudohifas; se tiñen de azul/morado tras la tinción de Gram, por lo que se comportan como microorganismos gram-positivos:

Citología exfoliativa.

Colposcopía.

Biopsia.